课题3 酵母细胞的固定化
一、固定化酶的应用实例
(1)能将葡萄糖转化成果糖的酶是葡萄糖异构酶。
(2)固定化酶技术使用的反应柱上的孔应满足酶颗粒无法通过,反应溶液自由通过,若反应物颗粒过大则不能用此法。
二、固定化细胞技术
(1)固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。其中细胞多采用包埋法固定化。
(2)包埋法固定化细胞是将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中。常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。
三、实验操作
1.制备固定化酵母细胞
(1)酵母细胞的活化:向干酵母中加入蒸馏水,搅拌混匀。
(2)配制CaCl2溶液:向无水CaCl2加入蒸馏水,充分溶解。
(3)配制海藻酸钠溶液:酒精灯加热时要用小火或间断加热,且边加热边搅拌,直至完全溶化,最后用蒸馏水定容。
(4)海藻酸钠溶液与酵母细胞混合。
(5)固定化酵母细胞:以恒定速度缓慢将上述混合液滴加到CaCl2溶液中,形成凝胶珠,并在CaCl2溶液中浸泡。
2.用固定化酵母细胞发酵