1.2 基因工程的基本操作程序
目标导航 1.结合教材图1-6,整体把握并说出基因工程的基本操作程序。 2.理解获取目的基因的途径及基因表达载体的构建。3.理解目的基因导入受体细胞的方法、检测与鉴定目的基因的方法。
一、目的基因的获取(阅读P8-11)
1.基因工程的基本操作程序
(1)目的基因的获取。
(2)基因表达载体的构建。
(3)将目的基因导入受体细胞。
(4)目的基因的检测与鉴定。
2.目的基因的获取
(1)目的基因
主要是指编码蛋白质的基因,也可以是一些具有调控作用的因子。
(2)常见方法
①从基因文库中获取
基因文库的种类
②利用PCR技术扩增目的基因
a.原理:DNA双链复制。
b.条件:引物、DNA模板、Taq酶、四种脱氧核苷酸。
c.过程:目的基因DNA受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合酶作用下进行延伸,如此重复循环多次。