专题三 胚胎工程及生物技术的安全性和伦理问题
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1．(16分)下图为绿色荧光小鼠制备流程图，Gfp是绿色荧光蛋白基因，请分析回答：
(1)构建表达载体需要的酶是________________，表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp、________________、________________、终止子和复制原点等。
(2)图中载体上的Neo基因是一种抗生素抗性基因，图中步骤③所用的G418是一种抗生素(对细胞有毒害作用)，添加G418的目的是__________________________。
(3)图中所用的胚胎干细胞来自于____________________。
(4)图中步骤⑤要将细胞注射入图中囊胚的________位置，图中步骤⑥胚胎移植前要对代孕母鼠用激素进行____________________处理。
(5)可以使用________________方法在蛋白质水平上鉴定小鼠是否存在绿色荧光蛋白。
解析 (1)基因工程中常用限制性核酸内切酶切割目的基因和运载体，后用DNA连接酶连接目的基因和运载体。基因表达载体包括启动子、标记基因、目的基因、复制原点、终止子等。(2)Neo基因是一种抗生素抗性基因，而G418是一种抗生素，该物质对细胞有毒害作用，所以培养液中添加G418可将导入目的基因的胚胎干细胞筛选出来。(3)胚胎干细胞来自早期胚胎或原始性腺，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。(4)囊胚时期的内细胞团将发育成幼体的各种组织
