专题5 DNA和蛋白质技术
第16课时 DNA的粗提取与鉴定
目标导航 1.了解DNA的物理性质。2.理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。
一、提取DNA的方法
1．提取生物大分子的基本思路
(1)选用一定的________或________方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
(2)DNA的粗提取就是利用DNA与________、________和________等在物理或化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
2．提取DNA分子的基本原理
(1)利用DNA的溶解性
①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一点，选择适当浓度的NaCl溶液就能使DNA溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离的目的。
DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。
|
|
溶解规律
|
2 mol/L NaCl
|
0.14 mol/L NaCl
|
|
DNA
|
在NaCl溶液中，浓度为________ mol/L时溶解度________
|
溶解
|
析出
|
|
蛋白质
|
NaCl浓度从2 mol/L降低过程中，溶解度逐渐增大
|
部分发生
盐析
|
溶解
|
由上表可以看出，在NaCl为2 mol/L时DNA________，而部分蛋白质发生盐析而生成________，通过过滤可除去部分________；NaCl为0.14 mol/L时DNA________，过滤可除去溶解的部分________。
②DNA不____酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则____酒精。利用这一原理，可将DNA与蛋白质进一步分离。
(2)利用DNA和蛋白质对酶、________和________的耐受性不同
①蛋白酶能水解蛋白质，但对________没有影响。
②大多数蛋白质不能忍受________的高温，而DNA在80℃以上才会变性。
③洗涤剂能够溶解________，但对________没有影响。
(3)DNA的鉴定：DNA在沸水浴的条件下，遇________会染成________。
二、提取DNA及鉴定DNA的实验流程
1．实验材料的选取
