第17课时 多聚酶链式反应扩增DNA片段
目标导航 1.知道细胞内参与DNA复制的各种组成成分与反应条件；知道DNA合成方向。2.理解PCR的原理；掌握PCR的基本步骤及每个步骤前后发生的变化。
一、PCR技术的原理
1．PCR扩增方向
(1)3′端和5′端：为了明确地表示DNA的方向，通常将DNA的羟基(—OH)末端称为________，而含____________的末端称为________；一个双链DNA分子中含两个3′端和两个5′端，如果一条链的方向是________，则另一条链的方向就是________，这就是反向平行的含义。
(2)DNA分子中相邻两个脱氧核苷酸残基通过________________相连，该化学键是由一分子脱氧核苷酸中3号碳原子上的羟基(—OH)，与相邻的另一分子脱氧核苷酸中5号碳原子上的磷酸基团脱水聚合而成。所以DNA的合成方向总是从子链的________向________延伸。
2．PCR技术原理
(1)PCR原理：DNA分子在一定条件下可以进行半保留复制。
(2)DNA的热变性原理：在________的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为________；当温度缓慢下降后，两条被分离的DNA链又会重新结合成双链，这个过程称为________。
3．生物体内DNA复制与PCR反应的区别
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体内复制
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PCR反应
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解旋
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在______作用下，细胞提供能量，部分解开
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加热至______，双链全部解开，不需解旋酶
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引物
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一小段RNA
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可以是RNA或单链DNA分子片段
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合成子链
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在引物基础上，一条链连续合成，另一条链不连续合成
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分别从两条链的______开始，都是连续合成，控制温度______
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特点
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____________，半保留复制
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体外迅速扩增
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Taq DNA聚合酶
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______
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____
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循环次数
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受生物体自身控制
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30多次
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相同点
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生物体内的DNA复制和PCR体外DNA扩增都需要____、____________作原料、____，子链延伸的方向都是从______到______，且都需要在一定的缓冲溶液中进行
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