第18课时 血红蛋白的提取和分离
目标导航 1.了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。2.理解缓冲液的组成和作用机理。3.体验提取生物大分子的基本过程和方法。
一、分离蛋白质的基本方法原理
1．蛋白质的分离方法——凝胶色谱法
凝胶色谱法也称做________________，是根据________________的大小分离________的有效方法。
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相对分子质量
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直径大小
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运动方式
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运动速度
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运动路程
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洗脱
次序
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大
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____凝胶颗粒空隙直径，被排阻在____
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垂直向下移动
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____
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较短
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先从凝胶柱洗脱出来
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小
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____凝胶颗粒空隙直径，可以进入颗粒内部
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垂直向下移动，无规则扩散进入凝胶颗粒
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____
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较长
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后从凝胶柱洗脱出来
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2.缓冲液的作用和组成
(1)作用
在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界________和________对溶液________的影响，维持pH基本不变。
纯水的pH因加入少量的强酸或强碱而发生很大变化。然而，1滴浓盐酸加入到1 L CH3COOH—CH3COONa混合溶液或NaH2PO4—Na2HPO4混合溶液中，[H＋]的增加不到百分之一(从1.00×10－7 mol/L增到1.01×10－7 mol/L)，pH没有明显变化。
(2)组成
缓冲溶液通常由________种缓冲剂溶解于水中配制而成，调节缓冲剂的____________就可以制得________________________的缓冲液，其类型主要有3种：
①弱酸及其对应盐，如CH3COOH—CH3COONa，H2CO3—NaHCO3。
②多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐，如
NaHCO3—Na2CO3，NaH2PO4—Na2HPO4。
③弱碱及其对应盐，如NH3·H2O—NH4Cl。
3．电泳
(1)概念
电泳是指____________在________的作用下发生________的过程。许多重要的生物大分子，如________、________等都具有可解离的基团，在一定
