一、选择题
1.关于PCR的说法,不正确的是( )
A.PCR是体外复制DNA的技术
B.PCR过程中只需要一个模板DNA、两个引物分子、大量脱氧核苷酸原料
C.Taq DNA聚合酶是一种热稳定的DNA聚合酶
D.PCR利用的是DNA双链复制原理
解析:PCR技术是一种在体外迅速扩增DNA片段的技术;PCR过程除需要DNA分子双链作为模板、两种引物分子、大量脱氧核苷酸原料外,还需要酶等条件;Taq DNA聚合酶是一种耐热的DNA聚合酶;PCR技术的原理和DNA的复制原理是一样的,都是半保留复制。
答案:B
2.PCR技术控制DNA的解聚与结合是利用了DNA的( )
A.特异性 B.稳定性
C.热变性 D.多样性
解析:DNA分子在80~100 ℃的温度范围内变性,双链解开成单链;当温度缓慢降低时,又能重新结合形成双链。
答案:C
3.PCR实验中用到微量离心管、缓冲液和蒸馏水,使用前必须进行的关键步骤是( )
A.反复洗涤 B.用酒精擦洗
C.高压灭菌 D.在-20 ℃保存
解析:在PCR实验中,为了避免外源DNA等因素的污染,微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌。同时也不能忽视其他操作步骤,如缓冲液和酶应该分装成小份,并且在-20 ℃保存。
答案:C
4.标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步,这三大步需要的温度依次是( )
A.92 ℃、55 ℃、72 ℃ B.72 ℃、55 ℃、92 ℃
C.55 ℃、92 ℃、72 ℃ D.80 ℃、55 ℃、72 ℃
解析:当温度上升到90 ℃以上(90~96 ℃)时,双链DNA解聚为单链,称之为变性;当温度下降到50 ℃左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合,称之为复性;当温度上升到72 ℃左右(70~75 ℃)时,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在Taq DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,称为延伸。
答案:A