一、选择题
1.凝胶色谱法是分离蛋白质分子的一种常用方法,但并非所有的蛋白质都可用此方法进行分离。能分离的蛋白质分子之间必须( )
A.具有相同的相对分子质量
B.相对分子质量不同,但都是相对分子质量较大的分子
C.相对分子质量不同,但都是相对分子质量较小的分子
D.相对分子质量不同,但都在一定范围之内
解析:相对分子质量大小不同的多种成分在通过凝胶时,按照相对分子质量大小“排队”,从而将各种成分分开。在每种凝胶分离范围之外的分子,在不改变凝胶种类的情况下是很难分离的。
答案:D
2.下列关于凝胶色谱法的原理及操作,不正确的是( )
A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法
B.在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而最先流出;小分子因进入凝胶内部而流速缓慢,后流出
C.凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系
D.一般情况下,凝胶对要分离的物质没有吸附作用,因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来
解析:选用不同种凝胶,其立体网状结构不同,孔隙大小不同,因此可分离出的分子大小也不同。凝胶一般对分离的物质无吸附作用,所有要分离的物质都应该被洗脱出来,这是凝胶色谱法与一般层析法的不同。
答案:C
3.下列关于凝胶柱上加入样品和洗脱操作的叙述,不正确的是( )
A.加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐
B.让吸管管口沿管壁环绕移动贴壁加样至色谱柱顶端,不要破坏凝胶面
C.打开下端出口,待样品完全进入凝胶层后,直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱
D.待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,每5 mL收集一管,连续收集流出液
解析:样品完全进入凝胶层后,加入磷酸缓冲液到适当高度,再连接缓冲液洗脱瓶,开始洗脱。
答案:C