1．PCR原理
（1）细胞内DNA复制条件
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条件
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组分
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作用
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模板
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DNA的两条单链
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提供复制的模板
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原料
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四种脱氧核苷酸
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合成DNA子链的原料
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酶
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解旋酶
DNA聚合酶
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打开DNA双螺旋
催化合成DNA子链
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能量
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ATP
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为解螺旋和合成子链供能
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引物
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RNA
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为DNA聚合酶提供合成的3’端起点
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（2）细胞内DNA复制过程
①DNA的两条链是反向平行的，通常将DNA的羟基末端称为3’端，而磷酸基团的末端称为5’端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3’端延伸DNA链，因此，DNA复制需要引物。DNA的合成方向总是从子链的5’端向3’端延伸。
②在DNA的复制过程中，复制的前提是双链解开。在体外可通过控制温度来实现。在80~100 ℃的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为变性。PCR利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。由于PCR过程的温度高，导致DNA聚合酶失活，后来耐高温的DNA聚合酶的发现和应用，大大增加了PCR的效率。
③PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行，需提供：DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，耐热的DNA聚合酶，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。
