1.(8分)科学家利用细胞融合技术研究细胞膜的结构特性,进行了下列实验。
(1)将鼠细胞和人细胞在________培养箱中培养一段时间,用________处理,获取实验用的单细胞悬液。
(2)将两种细胞在37 ℃下混合培养,在培养液中加入______________诱导融合,形成融合细胞,一般两两融合的细胞有_____________种。
(3)细胞膜的主要成分是磷脂和蛋白质。将连接了荧光染料的抗体与融合细胞在一定条件下培养,抗体与融合细胞的膜蛋白(抗原)特异性结合,其目的是标记膜蛋白,以便于显微镜观察。用荧光显微镜观察融合细胞表面荧光的颜色和________,开始时,鼠的细胞为绿色,人的细胞为红色,两种颜色不混合;一段时间后,可观察到红绿荧光交替分布的“嵌合体”。统计__________,结果如图所示。
(4)科学家据此提出两种假说解释嵌合体的形成。
假说一:融合细胞合成了新的膜蛋白;
假说二:原有膜蛋白在细胞膜平面上运动。
①使用_______________抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞,均对嵌合体形成没有显著影响,这个结果否定了假说一。
②在15 ℃、20 ℃和26 ℃的培养温度下重复上述实验,这些实验的结果为___________,为假说二提供了证据支持。
解析:(1)动物细胞培养需要一定的气体环境,因此需要放到二氧化碳培养箱中培养;由于胰蛋白酶能水解细胞膜表面的蛋白质,因此常用胰蛋白酶处理动物组织,使组织细胞分散开,进而制成细胞悬液。(2)诱导动物细胞融合常用(灭活的)病毒(或PEG);融合后的细胞一般有3种。(3)细胞膜主要由磷脂和蛋白质组成;抗体与荧光染料结合后抗体被标记,当抗体与融合细胞的膜蛋白(抗原)特异性结合时,膜蛋白就被标记;用荧光显微镜观察融合细胞表面荧光的颜色和分布,并观察和统计嵌合体比例。(4)①假如用蛋白质合成抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞,嵌合体形成会受影响则支持假说一,否则不支持假说一。②若随着温度增加,嵌合体比例增加(或随着温度降低,嵌合体比例降低)则支持假说二。
答案:(每空1分)(1)二氧化碳 胰蛋白酶 (2)(灭活的)病毒(或PEG) 3 (3)分布 嵌合体比例 (4)①蛋白质合成 ②随着温度增加,嵌合体比例增加(或随着温度降低,嵌合体比例降低)