（二）体外受精与胚胎的早期培养
1．体外受精的原理
人工模拟体内环境(包括营养、温度、pH等)，使初级卵母细胞成熟和精子获能，最终完成受精和胚胎保存。
2．体外受精主要操作步骤
(1)卵母细胞的采集
方法一：对小型动物一般采用促性腺激素处理，排卵后直接从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。
方法二：对大型动物一般从活体的卵巢中吸取卵母细胞，经体外人工培养成熟后与获能的精子在体外受精。
(2)精子的采集和获能
①采集方法：假阴道法、手握法和电刺激法等。
②获能方法：主要有培养法(啮齿动物、家兔、猪等)和化学诱导法(牛、羊等家畜的精子常采用化学法，即将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导精子获能)。
(3)受精：获能精子和成熟卵子在共同培养一段时间后便可受精。
3．胚胎的早期培养
(1)培养的目的：检测受精状况和受精卵的发育能力。
(2)培养液的成分：水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等。
(3)胚胎去向：冷冻保存、移植到受体动物子宫内培养。
【特别提醒】①体外受精时，精子与卵子在体外结合前，需要对精子进行获能处理，并将卵母细胞培养成熟至减数第二次分裂中期。
②胚胎发育的起点是受精卵，发育过程中的细胞分裂均为有丝分裂。
③桑椹胚细胞仍具有全能性，是胚胎分割的最佳时期。
④囊胚是开始分化的阶段，分化为滋养层细胞——发育成胎膜和胎盘等结构和内细胞团细胞——发育成胎儿，该阶段还可进行胚胎分割。
⑤孵化——囊胚后期，透明带破裂，胚胎伸展出来；原肠胚早期还保留缩小的囊胚腔，最后消失。
